Act-1核心启动子转录的EGFP基因在秀丽隐杆线虫体内的表达

摘要

克隆获得的秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)Act-1基因的核心启动子,经BglⅡ和HindⅢ限制性内切酶消化后,与用相同酶消化的pEGFP-4.1载体连接(由pEGFP-N1去掉CMV启动子形成),构建重组表达载体Pact-EGFP.通过脂质体介导转染Veto细胞,结果发现EGFP在Vero细胞中有表达,但表达量很低.通过显微注射将Pact-EGFP与pRF4共注射到C. elegans性腺,结果发现EGFP能够在C. elegans的皮层、副皮层以及咽部表达,根据表达部位不同,获得了2种转基因线虫株.研究结果显示:EGFP在C. elegans体内的表达水平明显高于在Vero细胞内的表达,表明C.elegans Act-1基因的核心启动子区域可能存在与转录水平密切相关的独特的转录调节元件.该研究为进一步实现寄生性线虫基因在C.elegans表达提供了参考.