DNA聚合酶δ结合蛋白38是microRNA-291a-5p的一个靶基因

摘要

DNA聚合酶δ结合蛋白38(DNA Polymerase delta-interacting protein 38,PDIP38)是2003年新鉴定的一个基因,目前认为其可能在DNA修复、有丝分裂以及血管平滑肌细胞迁移中起重要作用.根据本实验室前期在胚胎干细胞中对该基因的研究,认为microRNA可能在PDIP38的调控过程中发挥了重要作用.为证实这种推论,运用生物信息学方法预测发现在胚胎干细胞中高表达的microRNA--microRNA-291a-5p(miR-291a-5p)与PDIP38的开放阅读框(ORF)有一个配对非常理想的靶位点,通过构建该靶位点的报告基因载体以及ORF表达载体,分别进行荧光素酶报告基因分析以及细胞转染和Western blotting方法.结果证明miR-291a-5p能够直接调节PDIP38的蛋白表达.进一步运用real-timePCR和Western blotting分析证明了在胚胎干细胞中miR-291a-5p能够调节内源PDIP38的蛋白表达而对其mRNA表达无影响,这些都证明PDIP38确实是miR-291a-5p的一个靶基因.