山羊克隆胎儿不同组织中H19基因CpG岛甲基化模式及表达量检测

摘要

表观重编程异常是核移植胚胎发育异常的重要原因.为了研究克隆山羊胎儿不同组织中H19基因CpG岛甲基化水平和相对表达量,本实验运用亚硫酸盐法和荧光实时定量PCR法分别检测了死亡克隆山羊胎儿和同期普通山羊胎儿(对照组)肝脏,胎盘、肾脏、肺脏和心脏组织中H19基因CpG岛甲基化水平和mRNA的相对表达量.结果表明,克隆山羊胎儿胎盘组织中H19基因第5个CpG岛的甲基化水平显著高于对照组(70% vs 49.41%,P<0.05),H19基因相对表达量显著低于对照组(883.3 vs 1 264.5,P<0.05);肺脏组织甲基化水平显著低于对照组(63.53% vs 88.24%,P<0.05),相对表达量显著高于对照组(1 003.4 vs 515.5,P<0.05);其他各组差异不显著(P>0.05).结果说明,H19基因在克隆山羊胎儿部分组织中DNA甲基化重编程异常,而且这种异常影响H19基因的正常表达,这也可能是导致克隆动物死亡的重要因素之一.