荧光素酶mRNA的构建及电穿孔介导的mRNA体内表达特性

摘要

为构建一种非复制型mRNA平台并探究电穿孔介导的mRNA对小鼠健康状况的影响及蛋白的表达情况，以荧光素酶作为靶标基因，用T7RNA聚合酶体外转录及酶法加帽加尾的策略制备mRNA，用活体基因导入仪通过电穿孔的方式体内递送mRNA，借助小动物活体成像系统观测荧光素酶蛋白在小鼠体内的表达强度和持续时间。结果表明，使用该非复制型mRNA平台得到的mRNA成功在体内外表达，电穿孔介导的mRNA对小鼠健康体征无明显影响，所有的小鼠均成功表达了荧光素酶蛋白，蛋白表达在电穿孔后第1天达到峰值，在第4天迅速下降，但蛋白表达强度和持续时间存在较大的小鼠个体间差异。研究对非复制型mRNA的构建及其应用于疫苗或肿瘤药物研发具有重要参考价值。