黏虫几丁质酶MsCHT7基因的克隆、表达及蜕皮激素的调控

摘要

几丁质酶是几丁质水解的关键酶，在昆虫生长发育中具有重要作用。本试验通过高通量转录组测序获得黏虫几丁质酶基因cDNA序列MsCHT7（GenBank登录号MG551526）。cDNA全长3360 bp，包含一个长度为2970 bp的开放阅读框，编码989个氨基酸，具有1个糖苷水解酶18家族高度保守序列，2个Glyco18催化结构域和1个几丁质结合结构域ChtBD2。通过基因表达水平研究发现，黏虫MsCHT7基因在不同发育阶段和不同组织中均有表达，且具有差异性。预蛹期和表皮MsCHT7基因表达量最大，蛹期最后1 d和成虫表达量较高，且幼虫各龄期最后1 d表达量均高于第1 d表达量。20E（20-羟基蜕皮酮）处理幼虫后，不同时间点MsCHT7基因表达量存在显著差异，在1～24 h基因表达量随时间逐渐升高，24 h时最高，之后表达量迅速降低。4种不同浓度20E处理后，MsCHT7基因表达量存在一定差异，当浓度为10 μg/μL时，MsCHT7基因表达量最大。通过生物学观察发现，不同浓度20E处理后5龄幼虫蜕皮时间均提前。由于MsCHT7基因表达量受蜕皮激素调控，MsCHT7可能在黏虫蜕皮过程中发挥一定作用。