转木霉菌激发子基因的链霉工程菌株构建及检测

摘要

里氏木霉菌Trichoderma reesei QM 6a蛋白激发子基因xyn2及绿木霉菌蛋白激发子基因sml通过调节植物乙烯、茉莉酸等信号途径激发其诱导抗性，提高其免疫力。本研究根据天蓝色链霉菌偏爱密码子人工合成了这两个基因，将其单价连接到链霉菌表达载体pIB139中。通过酶切鉴定的阳性质粒pIB139-xyn20（sml）转化入ET12567（pUZ8002）中间菌株，利用接合转移技术定点整合到利迪链霉菌A01基因组中，采用PCR技术鉴定工程菌株A01-xyn2（sml）。随后构建A01-xyn2＋sml双价链霉菌工程菌株并验证。实验结果表明：利用接合转移技术已成功获得含xyn2，sml，xyn2＋sml的链霉菌工程菌株，将实现抗生与诱抗的协同作用，提高防治植物病害的效果。