小菜蛾腺苷受体基因PxAdoR克隆及杀虫靶标作用

摘要

利用蝉花虫草Ophiocordyceps sobolifera代谢产物N6-(2-羟乙基)腺苷(HEA)作用于小菜蛾Plutella xylostellaL.获得差异表达的片段,采用RT-PCR和RACE技术从小菜蛾中克隆全长1828 bp的小菜蛾腺苷受体(Plutella xylostella adenosine receptor,PxAdoR)基因,通过生物信息学软件预测和分析蛋白质结构,PxAdoR为分子量49.2 kD,没有信号肽,疏水性不稳定蛋白,具有7次跨膜螺旋结构的一类G蛋白偶联受体(G protein coupled receptor,GPCRs).利用HEA及哺乳动物腺苷受体A2aR抑制剂SCH58261处理小菜蛾2龄幼虫,结果显示联合使用HEA和SCH58261后36～60h,可使HEA引起的小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率显著降低(42.7％～53.9％,P＜0.05);而联合用药后36、48、60 h小菜蛾2龄幼虫体重增长抑制率由43.3％、38.3％、46.2％显著降低(P＜0.05)到13.2％、10.3％、8.6％.本研究表明SCH58261能显著降低HEA引起的小菜蛾2龄幼虫的死亡率和体重增长抑制率,HEA可能是通过PxAdoR而起作用,PxAdoR 基因可以作为新的杀虫靶点用于害虫控制研究.