rHAP在大肠杆菌中的诱导条件优化

摘要

目的 研究用乳糖替代异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂进行重组rHAP的表达.方法 研究了rHAP基因工程大肠杆菌的生长、工程茵表达rHAP时IPTG诱导表达的起始工程茵浓度、诱导物IPTG和乳糖的用量及乳糖诱导时间与rHAP表达水平之间的关系.结果 在摇瓶实验中,通过优化,选择在培养物的A560值达到3.0时进行诱导剂诱导可以使重组蛋白的表达实现最大化;使用乳糖进行诱导,在浓度0.5 g/L时可以使rHAP的表达量与1 mmol/L的IPTG诱导时相当;诱导时间控制在3 h可使目的 蛋白的产生量达到最大,能够占到总可溶性蛋白的20%.结论 获得了使用乳糖作为诱导剂获得rHAP的最适诱导条件,降低了成本,为规模化生产打下了基础.