L-苏糖酸镁对局灶性脑缺血大鼠神经保护作用及机制

摘要

目的 探讨L-苏糖酸镁（magnesium-L-threonate,L-MgT）及硫酸镁（magnesium sulfate,MgSO4）对大鼠局灶性脑缺血急性期神经行为学的作用及对神经细胞内诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）表达的影响。方法 112只SD雄性大鼠采用双盲法随机分成假手术组（sham组）、大脑中动脉闭塞组（middle cerebral artery occlusion,MCAO组）、MgSO4组和L-MgT组,每组28只。参照Longa法建立MCAO模型后,分别采用Longa评分、肢体对称性评分、转棒和粘条行为测试评价神经症状、感觉和运动协调功能。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色法测定再灌注后24 h脑梗死体积,并利用免疫组织化学染色法检测再灌注后6 h、12 h、24 h脑缺血组织中iNOS蛋白表达。结果 行为学评估：Longa评分实验显示：sham组表现正常；与MCAO组[（1.86±0.14）分]比较,MgSO4组[（1.71±0.18）分]与L-MgT组[（1.14±0.14）分]大鼠Longa评分降低（t＝0.548,3.873,均P＆0.05）；L-MgT组大鼠的Longa评分较MgSO4组降低,差异有统计学意义（t＝2.828,P＆0.05）。肢体对称实验显示：MgSO4组评分与MCAO组比较差异无统计学意义,但是L-MgT组评分与MCAO组比较升高,差异有统计学意义（t＝7.071,P＆0.05）。转棒实验显示：MgSO4组和L-MgT组时间与MCAO组比较差异有统计学意义（t＝9.588,20.776,P＆0.05）,但是L-MgT组时间与MgSO4组比较升高,差异有统计学意义（t＝4.983,P＆0.05）。右肢扯掉粘条实验显示：MgSO4组和L-MgT组时间与MCAO组比较差异有统计学意义（t＝6.135,5.825,P＆0.05）,但是L-MgT组时间与MgSO4组比较升高,差异有统计学意义（t＝4.507,P＆0.05）。TTC实验显示：sham组无梗死灶形成；与MCAO组[（36.82±1.35）%]比较,MgSO4组[（17.39±1.72）%]和L-MgT组[（10.81±1.35）%]脑梗死体积明显减小,差异有统计学意义（t＝8.874,11.105,P＆0.05）；与MgSO4组比较,L-MgT组脑梗死体积明显减小,差异有统计学意义（t＝2.593,P＆0.05）。HE染色显示：各时间点,MgSO4组细胞形态与MCAO组比较差异无统计学意义,但是L-MgT组细胞形态与MCAO组比较保存完整。24 h iNOS染色显示：MgSO4组阳性细胞密度与MCAO组比较差异无统计学意义,但是L-MgT组[皮质：（196.7±8.1）；纹状体：（153.3±3.8）]阳性细胞密度与MCAO组[皮质：（375.0±6.7）,纹状体：（358.3±4.5）]比较降低,差异有统计学意义（t＝11.113,36.231,P＆0.05）。结论 大鼠脑缺血后急性期给予L-MgT具有显著的神经保护作用,其机制可能与调节神经细胞iNOS的表达有关。