甲基乙二醛对大鼠海马神经元的毒性作用及脑源性神经营养因子、TrKB表达的影响

摘要

目的探讨葡萄糖降解产物甲基乙二醛（MG）对海马神经元的毒性作用及可能机制。方法取新生24h Sprague-Dawley大鼠海马神经元原代培养至第7天,给予MG干预24h,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测海马神经元存活率,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V联合碘化丙啶（PI）法检测海马神经元的凋亡率,采用实时RT-PCR法及Western印迹法测定脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体酪氨酸蛋白激酶（TrkB）mRNA和蛋白表达水平。结果1.随着MG浓度的增加及干预时间延长,海马神经元存活率逐渐降低,呈浓度依赖性（r=0.946,P＜0.01）和时间依赖性（r=0.993,P＜0.01）。与0h组海马神经元凋亡率（1.633±0.153）%相比,100μM MG干预2 h、6h、12h和24h后,其凋亡率逐渐增加[分别为（2.833±0.153）%、（3.367±0.153）%、（4.433±0.404）%和（8.833±0.306）%;均P＜0.01];2.与同时间对照组相比,MG干预12h组及24h组海马神经元BDNF mRNA及蛋白表达增加（P＜0.05或P＜0.01）;而MG干预6h组、12h及24h组TrkB mRNA及蛋白表达减少（P＜0.05或P＜0.01）。结论MG对海马神经元具有直接毒性作用,可能首先抑制海马神经元TrKB表达,导致BDNF表达代偿性增高,损伤BDNF-TrKB通路,诱导神经元凋亡增加。