低氧预适应对氧糖剥夺损伤SH-SY5Y细胞的保护作用

摘要

目的:观察低氧预适应(HPC)对氧糖剥夺(OGD)损伤人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的保护作用,并探讨其可能机制.方法:SH-SY5Y细胞随机分为4组:正常对照组:常规培养,不进行OGD处理;HPC处理组:将神经元放入低氧培养箱内(2％O2),30 min后立即取出,再恢复常氧培养,反复5次;OGD组:无糖培养基、低氧培养箱内(1％O2)处理细胞10 h,然后复氧复糖培养24h;HPC+OGD处理组:细胞HPC后,行OGD处理.通过形态学观察,MTT比色法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)漏出量判断细胞损伤的程度,原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡水平,Western blot检测Caspase 3、低氧诱导因子1α(HIF-lα)的蛋白表达.结果:HPC可减轻OGD引起的SH-SY5Y细胞凋亡,降低LDH漏出量,明显增加OGD组SH-SY5Y细胞的活力(P＜0.05).Western blot显示HPC+ OGD组Cas-pase3蛋白的表达明显低于OGD组(P＜0.05);HIF-lα蛋白的表达明显高于OGD组(P＜0.05).结论:HPC对体外培养的SH-SY5Y细胞OGD损伤具有保护作用,其机制可能与上调HIF-lα蛋白有关.