环境激素邻苯二甲酸二丁酯免疫检测Ⅱ——抗体的制备

摘要

邻苯二甲酸二丁酯(DBP)半抗原衍生物通过偶氮键与载体蛋白BSA偶合后作为免疫原,免疫新西兰大白兔,得到合格的DBP抗血清,双向琼脂扩散方法测定血清效价为1:32～1:64,间接荧光免疫法检测效价为1:6 400～1:12 800.通过兔颈部采血、抗血清纯化,得到的抗邻苯二甲酸二丁酯多克隆抗体IgG冻干后,分装在-20 ℃低温保存.建立了间接荧光免疫法检测纯化抗体的方法.间接竞争荧光免疫法考察交叉反应试验结果显示,纯化抗邻苯二甲酸二丁酯抗体与邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丙酯、邻苯二甲酸二环己酯、邻苯二甲酸二戊酯、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯等邻苯二甲酸酯类环境激素的交叉反应均小于10%.制备的抗体可应用于环境激素DBP的荧光免疫分析.