荧光免疫分析

摘要： 为了提高食品中黄曲霉毒素B_(1)的分析效率和准确度,并降低时间和物质成本,在本次研究中,以花生样品的黄曲霉毒素B_(1)测定为例,建立了一种新的基于磁性纳米粒子(Magnetic Nanoparticles,MNPs)的荧光免疫分析检测方法。结果表明,回收率等指标均处于较优水平,可在今后作进一步研究和推广应用。

摘要： 荧光免疫分析技术作为一种高灵敏的免疫分析手段,具有准确性好、检测速度快、操作简单等优势,符合日益降低的污染限值形势下对快检方法的要求,近年来逐渐广泛地被应用于各类食品污染物的检测.本文从不同的荧光标记材料分类,分别介绍了 3类常用荧光标记材料(普通荧光微球、量子点、时间分辨荧光材料)和3类新型荧光标记材料(上转换发光纳米材料、磁性荧光纳米材料和荧光蛋白),比较了各类荧光材料的光学特性和分析性能,阐述了基于荧光免疫分析技术的食品中污染物检测方法,对荧光免疫分析技术在食品污染物检测方面取得的新进展进行综述.

摘要： 目的:分析全自动荧光免疫分析仪(GSP分析仪)检测新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的性能.方法:应用GSP分析仪检测国家卫生健康委临床检验中心室间质量评价质控品和G6PD试剂盒(荧光分析法)的低、高质控品,计算准确度和精密度.采用GSP分析仪和半自动荧光免疫分析仪(1420分析仪)同步检测2622例新生儿筛查标本和41例确诊患儿的标本,分析检测结果的相关性和一致性;采用GSP分析仪和1420分析仪检测漂浮和未漂浮标本各78例,比较检测结果差异;采用1420分析仪和GSP分析仪分别检测2017年1月至2018年12月1100384名新生儿筛查标本及2019年1月至2020年12月855856名新生儿筛查标本,比较两种仪器的筛查效能.对目前使用的切值(26 U/dL)的合理性进行评估,并通过百分位数法,以第99.1百分位建立GSP分析仪筛查G6PD缺乏症的新切值.结果:GSP分析仪检测5个不同浓度室间质控品的检测值与靶值的相对偏倚为0.71％～4.23％,检测G6PD测定试剂盒质控品的批内精密度为4.34％～4.91％,批间精密度为0.85％～2.12％,总变异系数为5.44％～5.72％,均符合实验要求.GSP分析仪和1420分析仪检测的G6PD活性存在明显的正相关(r=0.740,P0.05).GSP分析仪和1420分析仪筛查G6PD缺乏症的敏感度均为100.00％,且特异度均在99.80％以上.与1420分析仪比较,GSP分析仪筛查G6PD缺乏症的阳性预测值、初筛阳性率和诊断率均上升,假阳性率下降(均P<0.01).根据人群第99.1百分位建立新切值,男性为26.1 U/dL,女性为29.1 U/dL.结论:GSP分析仪检测性能良好,筛查效率高,更有利于疾病的检出,可用于临床新生儿G6PD缺乏症的大规模筛查.

摘要： 本文为了满足临床、急诊科室,还有基层医院、社区医院对免疫检测设备的需求,设计一款小型化、检测快速、操作简单的免疫分析系统。该系统包括一台主机和多台从机,每台设备具有六个检测通,可根据检测通量的需求,灵活配置从机数量。仪器的激发光源为单色LED,通过光电二极管检测试剂卡T线和C线上荧光微球发出的荧光,结合拟合方程即可计算出被测物的浓度;仪器在步进电机的驱动下,完成横向通道切换和纵向光电采集。仪器操作简单,检测快速,可广泛应用于食品安全检测、毒品检测、宠物检测等领域。

摘要： DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferases1,DNMT1)负责维持DNA甲基化遗传稳定性,其表达量与多种肿瘤的发生发展密切相关,是一种重要的肿瘤分子标志物。DNA甲基化转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)的现有检测方法大多基于原核生物酶建立,且局限于实验室研究,因此建立一种高灵敏、高通量测定人血清中DNMT1含量的荧光免疫分析方法(FLISA),以期为癌症早期筛查及临床应用提供新思路。以Fe3O4磁珠为固相载体,采用碳二亚胺/N-羟基硫代琥珀酰亚胺(EDC/Sulfo-NHS)键合法分别制备磁性免疫捕获探针Fe3O4@DNMT1小鼠单克隆抗体(Fe3O4@McAbDNMT1)及荧光免疫检测探针5-羧基四甲基罗丹明@DNMT1兔多克隆抗体(5-TAMRA@PcAbDNMT1)。用红外光谱、紫外-可见(UV-Vis)光谱、 Zeta电位、免疫活性分别表征偶联产物的结构与活性。在此基础上,采用双抗体夹心法,检测黑色96微孔板中反应产物的荧光强度,根据荧光强度与DNMT1浓度的关系进行定量分析,并进行方法学评价与比较。实验结果显示,双探针偶联成功,并保持了原抗体的免疫活性。该方法的线性方程y=222.046+48.323x,线性范围0.05~80 ng·mL-1,相关系数为0.991 4,检出限为0.005 ng·mL-1,板内、板间的RSD分别为4.7%~8.8%, 1.6%~10.0%(n=6);板内、板间的回收率分别为91.3%~102.4%, 88.0%~98.8%(n=6);方法特异性良好。与酶联免疫吸附法(ELISA)和磁酶免疫吸附法(MELISA)相比, FLISA法的检出限最低,灵敏度最高,所需分析时间最短;FLISA法与商品化ELISA试剂盒对15例人血清样品进行分析,差异无统计学意义(p>0.05)。表明本研究所建立的FLISA方法灵敏快速,适用于大批量人血清样品中DNMT1的快速测定,在临床诊断方面具有重要的应用价值和广阔的应用前景。

摘要： 1牛奶中抗生素的检测现状为保障食用牛奶的安全,加强对牛奶中抗生素残留检测十分必要。液相色谱-质谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱-串联质谱等仪器检测方法,可以准确地测定出牛奶中抗生素的具体残留量,但操作步骤繁琐,仪器设备要求严格,再加之鲜牛奶保质期限的短暂性,仪器检测法显然不适用于基层大批量现场检测。而快速检测技术由于操作简便快捷,已成为奶牛养殖企业和乳品生产加工企业日常监管的重要手段,其中荧光免疫分析技术因其灵敏度高、特异性好等优点正逐步成为发展的主流方向。

摘要： 酞酸二丁酯(DBP)具有一定的内分泌干扰作用,对环境健康产生不利作用.采用DBP抗体,建立了间接竞争性时间分辨荧光免疫分析方法(TRFIA),测定了镇江市内水域中DBP含量,以风险熵法评估其生态风险.结果显示:优化后的TRFIA方法半数抑制率IC50值为35.8 ng·mL-1,最低检测限为2.4 ng·mL-1,检测线性范围为4.7~272.6 ng·mL-1.该方法特异性高,DBP抗体与7种DBP结构类似物的交叉反应率低于4.65%,加标回收率为79.85%~119.20%,批内差为5.54%~9.93%,批间差为7.27%~14.01%.镇江市内河水中的DBP检出率为100%,质量浓度为5.89~94.57 ng·mL-1,河水中DBP分布存在较高的生态风险.%As an endocrine disruptor, dibutyl phthalate (DBP) has adverse effects on environment and human health.Using a polyclonal antibody of DBP, a sensitive indirectly competitive time-resolved fluorescence immunoassay(TRFIA) was proposed, and several parameters were investigated.DBP concentration in the rivers of Zhenjiang was determined, and the ecological risk was assessed by risk quotients.The results show that under the optimized conditions, the 50% inhibition concentration (IC50) value of TRFIA is 35.8 ng·mL-1 with limit detection value of 2.4 ng·mL-1 in the detection range from 4.7 to 272.6 ng·mL-1.The developed method shows high selectivity with cross-reactivities less than 4.65% to seven structurally related phthalate esters.The recoveries are from 79.85% to 119.20%, and the reproducibilities of intra-assay CV are from 5.54% to 9.93% with reproducibilities of inter-assay CV from 7.27% to 14.01%.The detection rate of DBP in the rivers of Zhenjiang city is 100%, and the concentration ranges from 5.89 to 94.57 ng·mL-1.There exists high ecological risk for DBP distribution in rivers.

摘要： 量子点是一种半导体纳米粒子,具有荧光量子产率高、激发光谱宽、发射光谱窄而可调、耐光漂白等独特的光学特性,在健康、食品安全、医药卫生、环境分析等诸多领域得到了广泛应用。简述了量子点的基本特性,针对近年来量子点荧光分析在痕量小分子有机污染物检测中的应用技术研究,从量子点标记荧光免疫吸附分析(QDs-FLISA)技术、荧光共振能量转移(FRET)技术、免疫传感器技术三个方面进行了综述.最后,就该研究领域存在的问题和发展方向提出了看法。

摘要： 量子点（quantum dots，QDs）是一种荧光纳米颗粒，具有荧光量子产率高、发射光谱窄、发射波长可调等优点，是近几年发展起来的一种新型荧光标记物，在食品中小分子有害物免疫检测中的应用已成为研究热点。本文总结介绍了3种常用的QDs与抗体/抗原偶联方法及其各自优缺点，并对基于QDs的荧光免疫分析方法在食品小分子有害物检测中的应用进行了详细综述。%Quantum dots (QDs) are semiconductor nanoparticles with very interesting optical properties like high quantum yield, and narrow and size-tunable fluorescence spectra. QDs are applied widely, especially as fluorescence labels in food safety detection that has received increased attention recently. In this review, three methods for coupling antibody/antigen to QDs are discussed. The development of QD-based fluorescent immunoassays for the detection of low molecular weight hazardous compounds in the food safety area is also demonstrated.

摘要： 目的：比较乙型肝炎表面抗原三种检验方法结果。方法对86例乙型肝炎患者进行检验，分别使用荧光免疫分析检测、酶联免疫吸附测定法（Engvail）以及胶体金法，并与86例非乙型肝炎患者的检验结果进行比较研究。结果三种检验方法中荧光免疫分析检测的精准度对高，酶联免疫吸附测定法检测数据准确度最低，三种方法对比，差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论在对乙型肝炎患者进行检测时，使用荧光免疫分析检测的准确度更高，能够及时对乙型肝炎表面抗原进行分析，适用于临床医学研究。

摘要： 与传统的有机荧光染料相比,量子点具有的多色、灵敏、稳定的荧光,且激发光谱宽发射光谱窄、荧光寿命长的特点,这些特性使得量子点成为一种更为理想的荧光标记物.本文将量子点这一新型标记物用于免疫分析,建立了测定环境内分泌干扰物-己烯雌酚的荧光免疫分析新方法.以IgG-QDs为标记物，建立了测定己烯雌酚的，并应用于样品中己烯雌酚的测定，将实验结果与IgG-FITC为标记物时的结果进行了比较。由数据比较可知，量子点由于其本身独特的光学特性，在一定程度上能够提高检测的灵敏度。

摘要： 建立了一种基于纳米Fe2O3标记的动力学荧光免疫分析法测定己烯雌酚的新方法。实验以纳米三氧化二铁标记抗体作为免疫分析的标记物，利用竞争免疫反应模式，以铁催化高碘酸钾猝灭罗丹明B荧光为检测体系，通过测定标记物中铁的含量来间接检测己烯雌酚。己烯雌酚的浓度在1.0 ng/mL～2000 ng/mL范围内与荧光猝灭强度呈线性关系，检出限为0.66ng/mL。该方法灵敏度高，选择性好，线性范围较宽，将其应用到水样中己烯雌酚的检测，结果满意。

摘要： 本文利用量子点标记的链霉亲和素为标记试剂，将生物素-亲和素系统应用于荧光免疫分析中，建立了一种测定雌三醇含量的分析方法。在选定的实验条件下，雌三醇浓度在0.01～1000ng/mL 浓度范围内与相对荧光强度有良好的线性关系，方法的检出限为0.0029ng/mL。对0.1ng/mL和100ng/mL的雌三醇标准溶液进行十次平行测定，求得其相对标准偏差均小于10%。方法应用于尿样和血清样品的测定，结果满意。该方法灵敏度高、特异性强，且操作快速、简便。

摘要： 本文通过调控荧光功能化硅烷前体和四乙氧基硅烷以及3-氨丙基三乙氧基硅烷在反相胶束体系中的水解缩合,首次制备了四羧基铝酞菁-二氧化硅复合荧光纳米粒子.并用以标记羊抗人IgG抗体,建立了基于纳米粒子标记的夹心型荧光免疫分析测定人IgG的方法。

摘要： 邻苯二甲酸酯(Phthalic Acid Esters PAEs)是一类普遍使用的化学工业品.由于邻苯二甲酸酯类化合物的大量生产与广泛应用,这类化合物已大量地进入环境,极为普遍地存在于土壤、底泥、水体、生物、空气及大气沉降物等环境样品之中.动物实验表明这类化合物具有致突、致畸活性,某些邻苯二甲酸酯(尤其是邻苯二甲酸环己二酯)表现出了致癌活性,并被确认为环境荷尔蒙类物质.为此,世界各国的有关部门及科学家已对邻苯二甲酸酯类有机污染物的环境公害引起特别关注.目前采用气相色谱法和液相色谱法测定邻苯二甲酸酯类的研究较多,这些方法或灵敏度不高,或设备昂贵.用荧光免疫法法测定酯类的研究还未见报道.本文使用自制的抗邻苯二甲酸环已二酯抗体作为一抗,FITC荧光标记山羊抗兔IgG为二抗,研究并建立了环境荷尔蒙物质邻苯二甲酸环己二酯的双抗体夹心荧光免疫分析方法.

摘要： 雌激素能够影响女性生殖系统的生长, 发育和功能。因其能进入人或动物的体内干扰机体内分泌物质的合成,释放,代谢和结合并且造成内分泌系统的紊乱,所以它也被认为是一种扰乱内分泌的环境污染物。过量环境雌激素的存在是对公共安全尤其是人类健康的严重威胁。雌二醇和雌三醇是两种重要的环境雌激素,因此建立一种灵敏并且快速的检测环境中雌二醇和雌三醇的方法具有重要的意义。

摘要： 由于Fe304纳米粒子具有很好的超顺磁性和量子点的优异的光学性质，所以，其磁性荧光纳米微球同时具备超顿磁性与光学特性，可以在外磁场的作用下快速地靶向移动与聚集，并且可以通过荧光检测来实现对生物分子标记与实时监测。本研究通过反相微乳法将翅顶磁性的Fe304纳米粒子和CdTe量子点包覆一起制备出磁性荧光纳米微球，利用这种新型的磁性荧光探针实现了对鸡新城疫病毒（NDV)和鸡病毒性关节炎病毒(AVAV)的免疫分析测定及在外磁场作用下实现对病毒的磁性分离。

摘要： 目前，测定环境中的萘（简称NA）的主要方法有：气相色谱（GC）、气质连用（GC-Mass）、高效液相色谱（HPLC）。此外，荧光光谱、实时PCR和间接竞争荧光免疫的方法都有报道。然而，在复杂样品的处理过程中，会失去一部分待测物，从而给测定结果带来影响。因此，寻找一种快速、灵敏且便宜有效的测定方法势在必行。本文建立了一种测定萘的新方法—直接竞争荧光免疫分析法，它是通过抗体和待测定NA 分子与抗原的竞争性结合反应后的荧光强度变化来测定的。

摘要： 本研究以沙丁胺醇为研究对象,采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速、高灵敏度的沙丁胺醇(SAL)全自动检测方法.该方法采用包被抗原直接竞争法,以SAL-OVA包被96微孔板作为固相抗原,与游离SAL直接竞争限量的以Eu 3+标记的抗SAL单克隆抗体,立解离增强模式的荧光免疫分析体系检测SAL.该方法的灵敏度为0.03 ng/mL,批内和批间变异系数分别为2.1％和8.8％,平均回收率为106.3％,与盐酸克伦、莱克多巴胺的交叉反应率分别为0.95％和0.77％,结果表明,用TRFIA法检测SAL灵敏度高、特异性强、稳定性好,具有良好的应用前景.

摘要： 作为一门涉及生物化学、流体物理、微电子、新材料和生物医学工程的新兴交叉学科技应用技术,微流控技术是指使用微道管处理或操作微小流体(体积为纳升到阿升)的系统学科技术.微流控技术具有微型化、集成化等特征,通常被称为微流控芯片,也称为芯片实验室(Lab on a Chip)和微全分析系统(micro-Total Analytical System).

摘要： 本发明提供了一种免疫荧光分析装置与免疫荧光分析方法，所述免疫荧光分析装置包括黑色滤膜，所述免疫荧光分析方法采用黑色滤膜截留被荧光标记抗体染色的待检测对象，同时滤过未与待检测对象结合的荧光标记抗体，之后采用荧光检测装置对所述黑色滤膜表面的截留物进行分析，实现荧光点的阅读和计数；所述免疫荧光分析方法的操作步骤简单，分析成本低，并且检测结果准确；所述免疫荧光分析装置的结构简单，生产成本低，使用方便，检测效果好；本发明的免疫荧光分析装置与免疫荧光分析方法能够广泛使用，不仅适用于大型医院与专业的实验室，在基层的医疗机构也能广泛使用。

摘要： 本发明公开了一种便携式荧光分析仪，包括试条仓，用于插入荧光层析快速诊断试纸条；激发光源，位于荧光层析快速诊断试纸条的显色区域正上方，用于激发荧光层析快速诊断试纸条上的荧光物质，产生荧光发射光；摄像头位于激发光源上的采集通道上方入口处，用于采集荧光试纸的荧光发射光；通讯模块，用于发送摄像头采集的图像；处理模块，用于控制激发光源、摄像头以及通讯模块协调工作。

摘要： 本发明公开了一种荧光层析免疫分析组件及双通道免疫分析仪，荧光层析免疫分析组件包括安装架和安装在安装架上的用于对样本进行检测分析的检测分析主板，还包括卡托架、光学检测组件、第一驱动机构和第二驱动机构，卡托架、光学检测组件均滑动设置在安装架上；第一驱动机构与卡托架连接并用于驱动卡托架在安装架上移动，卡托架用于安装测试卡；光学检测组件与第二驱动机构连接并通过第二驱动机构滑动设置在安装架上，第二驱动机构用于驱动光学检测组件移动；光学检测组件的移动方向与卡托架的移动方向相反，检测分析主板与光学检测组件连接。本发明在实际的时候用中能够实现多组数据的测定，具有检测效率高的优点。

摘要： 一种使用荧光标记物质的荧光偏振免疫分析，其中用荧光染料标记单结构域抗体。使用通过用荧光染料标记对目标物质具有结合能力的单结构域抗体(如VHH抗体或vNAR抗体)而获得的荧光标记物质。所述荧光偏振免疫分析包括用于将荧光标记物质结合到目标物质的结合步骤；以及用于测量与目标物质结合的荧光标记物质的荧光偏振的变化的测量步骤。

摘要： 本发明公开了一种基于荧光金纳米簇的免标记荧光酶联免疫分析方法。所述分析方法以蛋白包裹的荧光金纳米簇作为荧光信号探针，是酶标抗原上的葡萄糖氧化酶催化底物葡萄糖产生过氧化氢使体系中荧光金纳米簇的荧光猝灭，利用目标物和酶标抗原竞争结合在微孔板上的抗体，从而使体系的荧光发射光谱发生变化，可用于灵敏定量检测目标物分子。本发明所采用的荧光金纳米簇对葡萄糖氧化酶响应灵敏，同时免标记技术使荧光金纳米簇在本体系应用中的可控性、稳定性得到大大提高。本方法所构建的体系具有操作简便、灵敏度高、稳定性好、成本低廉等优点，可应用于灵敏定量检测动物饲料中的喹乙醇残留。

摘要： 本实用新型公开了一种荧光检测装置和荧光免疫层析分析仪，包括激发光发射单元和信号处理单元，所述信号处理单元包括信号采集单元和信号转换单元；由所述激发光发射单元发射出的激发光照射荧光区域，使所述荧光吸收光能后进入激发态，产生可见的发射光；所述发射光被所述信号采集单元接收，并经过所述信号转换单元将光信号转化为电信号。本实用新型提出的荧光检测装置和荧光免疫层析分析仪，可抗干扰，且精密度好，性能稳定，结构紧凑简单，便于大批量生产。

摘要： 本实用新型提供一种荧光激发与发射光学组件及免疫荧光分析仪，包括光学固定支架以及设置于该光学固定支架上部的一对荧光激发光源和激发光滤片，该激发光滤片位于荧光激发光源上部，且在两组荧光激发光源和激发光滤片中间部位设置有发射光滤片，该光学固定支架在发射光滤片部位开设通孔，发射光滤片设置于该通孔中；光学固定支架上部一体成型设置有用于放置荧光激发光源、激发光滤片以及发射光滤片的凸台，实际使用过程中，具有高亮度的荧光激发光源的激发光通过激发光滤片滤波，该激发光照射检测卡内的荧光染料激发荧光，荧光沿着直线通过发射光滤片，收集到智能手机的摄像头的传感器中，从而产生实时的荧光图像，结构设计合理，检测精确度高。

摘要： 本发明公开了一种用于消除荧光免疫分析仪中荧光噪声的检测仪，包括光学测量系统、信号处理系统和嵌入式控制系统，所述光学测量系统用于对待检测样本进行照射，使待检测样本受激发所辐射出荧光信号，光学测量系统包括光源、光源驱动电路、光源透镜组；所述信号处理系统用于将所述荧光信号转换成电信号及电信号的放大及滤波，信号处理系统包括光电检测器、信号放大器、滤波器、运算放大器；所述嵌入式控制系统用于所述电信号数模转换、去噪声处理、荧光信号的数据处理以及对输出的控制。

摘要： 本发明公开了一种用于荧光免疫分析仪校准和质控的荧光标准卡，包括荧光标准卡本体和荧光检测单元，荧光检测单元由荧光溶液、光固化荧光材料、荧光油墨或荧光墨水制得。所述荧光标准卡与使用质控品、参考品或标准品相比，具有发光性质稳定、不易随时间衰减，线宽精度高、荧光物质空间分布均匀，荧光物质的量和荧光强度呈线性以及制备一致性好的特点。还公开了一种测试方法，建立了一种荧光标准卡评估设备的方法和参数，该方法评估内容完整、易于操作，是一套系统的测量评估方案，有利于对荧光免疫分析仪进行校准和质控，提高了荧光免疫分析仪的检测准确性，以及各方法的溯源方案，能够可靠保证荧光标准卡在制作和使用过程中本身的属性严谨受控。

摘要： 本实用新型公开了一种时间分辨荧光免疫层析检测装置及荧光免疫分析仪。该时间分辨荧光免疫层析检测装置及荧光免疫分析仪较之传统的反射型检测装置，通过将激发光源和荧光检测器设于检测区的两侧，从而可以对从检测区的免疫层析检测传感器发出的荧光进行接收和检测，相对于传统的反射型检测方法，不仅可以检测免疫层析检测传感器表面的荧光信号，还可以检测到免疫层析检测传感器内部的荧光信号，进而可以提高检测的信号强度，有利于提高检测灵敏度。通过测试，使用上述时间分辨荧光免疫层析检测装置及荧光免疫分析仪来检测免疫层析试纸条的荧光信号，较之传统的反射法接收到的荧光信号的信噪比有效提高10％～20％。