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新型抗肿瘤抗生素C1027生物合成相关基因克隆的研究

     

摘要

C1027是由球孢链霉菌(Streptomyces globisparus)C1027产生的一种新型大分子肽类抗肿瘤抗生素,以pIJ702为载体,变青链霉菌(S.lividans)TK54为宿主,建立球孢链霉菌C1027总DNA的随机克隆文库,以C1027阻断变株AF40和AF44为互补对象,分别与随机克隆文库中的重组菌株进行共培养,经过抗菌和抗瘤活性检测,发现重组菌株No.28与阻断变株AF44,重组菌株No,74,No101与阻断变株AF40分别进行共培养能恢复变株的生物活性,并且SDS-PAGE结果显示,变株辅助诺蛋白的分泌得以恢复,证明重组质粒PIJ28,pIJ74和pIJ101所含插入片段与C1027生物合成相关,重组菌株No.74和阻断变体AF40的共培养产物经纯化以后,紫外光谱检测证明345nm处有C1027的特征吸收峰。

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