庆大霉素生物合成基因簇中抗性基因gmrB及gmrA的功能研究

摘要

目的 研究绛红色小单孢菌(Micromonospora purpurea)G1008中抗性基因gmrB与gmrA功能,为阐明庆大霉素生物合成机制奠定基础.方法 以红霉素抗性基因ermE分别置换gmrB和gmrA基因,构建突变株GerB102和GerA102.借助TLC和MS分析突变株代谢产物是否变化,同时检测突变株耐受自身代谢产物的能力是否发生变化.结果 突变株GerB102代谢产物没有发生明显变化,仍主要积累庆大霉素C化合物,而GerA102代谢产物发生变化.庆大霉素耐受性试验结果显示,GerB102和G1008耐庆大霉素浓度达到6000U/mL以上,而GerA102不足50U/mL.结论 gmrB既非庆大霉素生物合成的关键基因,也非关键的抗性基因,而gmrA是庆大霉素抗性的关键基因.