Contracaecum rudolphii姊妹种特异 PCR鉴定方法的建立

摘要

参考已测得的C.rudolphii姊妹种(C.rudolphii A和C.rudolphii B)及C.septentrionale的核糖体DNA(rDNA)内转录间隔1、2(ITS-1及ITS-2)核苷酸序列,设计、合成了针对C.rudolphii A、C.rudolphii B及C.septentrionale的特异性引物HFA(F)、HFA(R)、HFB(F)、HFS(F),通过PCR条件优化和扩增后,它们均能特异地扩增出目的DNA片段,分别是323、321、108 bp,而其它对照样品均未扩增出特异性片段,敏感性试验可检测到最低浓度分别为1.6、21.8、0.27 ng/μL.从而初步建立了鉴定C.rudolphii姊妹种的特异PCR方法.该方法特异性强、敏感度较高、重复性好,不仅可用于C.rudolphii姊妹种的分类鉴定,也可用于它们所导致的寄生虫病的诊断和流行病学调查.