猪传染性胸膜肺炎重组亚单位疫苗诱导小鼠免疫保护效果的观察

摘要

重组表达猪传染性胸膜肺炎放线杆菌6种主要毒力因子基因:apx Ⅰ、apxⅡ、apxⅢ、apxⅣ、apfa和omp,以重组蛋白rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rOMP组合免疫小鼠作为试验Ⅰ组,重组蛋白rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ、rOMP、rApxⅣ和rApfa组合免疫小鼠作为试验Ⅱ组,PBS为对照组,分3次免疫小鼠,采用背部皮下多点注射,每次间隔2周,免疫剂量为0.2 mL/只,3免后1周分别以APP1型菌Shope 4074株(5×109 cfu)和APP2型菌S1536株(5×1010cfu)进行攻毒试验.通过小鼠保护率与抗体效价的相关性研究、肺部病理变化及肺脏细菌的分布情况等指标进行综合评价.结果显示,试验Ⅰ组4种重组蛋白特异性抗体水平显著高于其他两组(P＜0.05),对APP1型菌攻毒的保护率(9/10)明显高于试验Ⅱ组(5/10)和对照组(0/8),小鼠的免疫保护率与抗体效价之间存在显著正相关;且该组对APP2型菌攻毒的保护作用(无肺脏损伤)也明显优于其它两组(典型肺部损伤).间接免疫荧光试验表明试验Ⅰ组对肺脏细菌的清除效果也明显优于其他两组.本试验揭示试验Ⅰ组对不同血清型APP攻击能够提供很好的交叉保护作用,从而为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考.