牛源致病性大肠杆菌floR基因的克隆、表达及其抗体的制备

摘要

将耐氟苯尼考大肠杆菌的floR基因部分基因片段插入pGEX-4T-2原核表达载体中,构建以BL21(DE3) Codon Plus为宿主菌的原核表达体系.通过优化诱导条件,确定了floR1基因能在pGEX/ BL21(DE3) codon plus中高效表达,且表达的重组蛋白为包涵体形式.对包涵体进行溶解复性后,将复性融合蛋白过GST亲和层析柱得到纯化的GST-FloR1融合蛋白.并以GST-FloR1融合蛋白为抗原免疫小鼠,成功制备出抗GST-FloR1融合蛋白的抗体.抗体的制备为FloR蛋白定位及其对氟苯尼考药物泵出功能抑制的研究奠定了基础.