13C标记法测定猪血液、大肠组织和大肠内容物中挥发性脂肪酸含量

摘要

试验旨在采用 13C稳定性同位素标记法对猪血液、大肠组织和大肠内容物中乙酸、丙酸、丁酸含量的气相质谱分析方法进行研究.首先对1头30 kg左右体况良好的生长猪从回肠瘘管处灌注 13C标记的乙酸、丙酸和丁酸,灌注结束后,采集血液离心并分装保存.屠宰后分别采集盲肠、结肠、直肠3段完整的肠道样品和肠道内容物,两者离心后均取上清液,经0.22 μm的有机系微孔滤膜过滤后保存.采用气相色谱-质谱联用法,利用Agilent DB-FFAP毛细管柱进行分离,特征离子进行定量,测定血液、大肠组织及肠道内容物中6种挥发性脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸、13C-乙酸、13C-丙酸、13C-丁酸)含量.结果表明:在测量浓度范围内,6种挥发性脂肪酸均具有良好的线性关系,相关系数均在0.99以上,乙酸、13C-乙酸、丙酸、13C-丙酸、丁酸、13C-丁酸检出限分别为0.15、0.21、0.62、1.18、0.39、0.82 μg/mL;6种挥发性脂肪酸浓度的日间与日内相对标准偏差均小于10%,且保留时间的相对标准偏差不超过0.5%;非同位素挥发性脂肪酸回收率在70.42%～119.00%,同位素标记的挥发性脂肪酸的回收率在73.23%～126.36%.本研究建立的方法可操作性强,简单快捷,可用于猪血液、大肠组织和大肠内容物中[13C]-挥发性脂肪酸含量的检测.