培养液和体外保存方法对辽宁绒山羊胚胎活力的影响

摘要

实验旨在研究辽宁绒山羊胚胎培养液和体外保存方法对胚胎活力的影响.以3～6岁供体母羊配种后第6天冲取的胚胎为实验对象,38.5℃、5％CO2、5％O2、90％N2饱和湿度条件下,比较DPBS、SOF、m-SOF培养液对胚胎活力的影响,筛选最佳胚胎培养液;以筛选出的培养液为胚胎保存液,比较保存方法Ⅰ、Ⅱ对胚胎活力的影响,其中保存方法Ⅰ为35 mm培养皿中做4个200μL液滴,上覆矿物油,2枚/液滴,用封口膜密封皿盖与皿体间隙,外包裹锡纸,置于38.5℃恒温板保存;保存方法Ⅱ为胚胎置入上覆矿物油的500μL保存液的1.5 mL离心管中,2枚/管,离心管口与盖用封口膜密封,外包裹锡纸,置于37℃便携式恒温箱中保存.结果 表明:添加1 mmol/mL丙谷二肽、5 g/Lβ-巯基乙醇、10 mmol/L HEPES和4 mmol/L NaHCO3的m-SOF液组胚胎发育率显著高于SOF组,极显著高于DPBS组;以m-SOF液为胚胎保存液,保存方法Ⅱ组在胚胎体外保存36 h时发育率极显著高于保存方法Ⅰ组,达42.76％.本实验条件下,m-SOF液为6日龄胚胎最佳培养液,保存方法Ⅱ体外保存胚胎36 h发育效果最好.