水牛卵母细胞体外受精与早期胚胎发育的研究

摘要

本实验通过3种水牛卵母细胞体外成熟培养系统的比较,与早期胚胎发育研究结果表明,3组是最好的培养系统,卵母细胞成熟率为51.9%(28/54);卵裂率为52.76%±9.08%(193/359);囊胚率(占授精卵数)为27.22%±9.17%(101/359)、(占分裂卵数)为52.13%±16.32%(101/193);孵化囊胚率为83.34%±11.56%(85/101).该系统为含10%FBS的TCM-199液中添加促性腺激素FSH、LH,类固醇激素E2,表皮生长因子(EGF)和硫醇类化合物β-巯基乙醇(β-ME)的较完善系统.据39批次早期胚胎体外发育至囊胚(343枚)所需时间(以授精当日为0d计算)分析,5d囊胚2枚(0.6%);6d囊胚89枚(25.9%);7d囊胚149枚(43.4%);8d囊胚73枚(21.3%);9d囊胚25枚(7.3%);10d囊胚5枚(1.5%).2头经超数排卵处理的母水牛,授精后第5d非手术回收3枚囊胚,说明受精卵在体外发育速度比在体内发育慢,推测试管水牛胚胎移植的适宜时间,应是受体母牛站立发情后第4～6d.