利用荧光实时定量PCR法测定猪肌肉中解偶联蛋白3 mRNA丰度

摘要

用SYBR Green I荧光实时定量PCR技术,以β-actin为参照基因,建立了猪肌肉中解偶联蛋白3(UCP3)基因mRNA丰度的定量分析方法.UCP3基因片段的PCR产物测序与GenBank中该基因的序列一致,定量PCR过程中UCP3的熔解曲线也表明该PCR过程为特异性扩增.猪肌肉样品UCP3 mRNA样品的批内和批间变异系数分别＜2%和＜11%,标准曲线R2=0.998,线性范围涵盖样品的Ct值.由此,实验建立的猪肌肉UCP3基因mRNA丰度测定方法是可靠的、准确的,可以用于猪肌肉中UCP3 mRNA丰度的测定.