藏绵羊胃溶菌酶基因的克隆、定量分析及其蛋白性质和结构的预测

摘要

本实验旨在研究藏绵羊溶菌酶组织基因组成、分布情况和蛋白质结构.通过RT-PCR方法克隆测序得到藏绵羊溶菌酶基因核苷酸序列,并对氨基酸的组成和功能活性位点如53-谷氨酸和71-天冬氨酸等进行统计;运用生物信息学软件对藏绵羊溶菌酶的等电点、信号肽序列等性质进行分析,并构建系统进化树;运用荧光定量PCR方法对藏绵羊的瘤胃、瓣胃、皱胃、肾脏、气管和肝脏分别进行检测溶菌酶基因的部分组织分布情况及其mRNA的表达水平.结果表明:此绵羊溶菌酶基因核苷酸序列为447 bp,编码148个氨基酸残基;其mRNA的表达水平在藏绵羊的瘤胃和瓣胃相对较高,与其他4种组织比较差异显著(P＜0.05);皱胃与肾脏也有显著性差异(P＜0.05).