LAMP-LFD技术在检测猪圆环病毒3型中的应用研究

摘要

为快速了解猪群中猪圆环病毒Ⅲ型(PCV3)的感染状况,本研究将环介导等温扩增技术(LAMP)与侧向流动试纸条(LFD)相结合,建立了快速检测PCV3 LAMP-LFD方法,并对该方法的特异性、灵敏性以及临床初步应用进行了验证分析。试验结果显示:常规PCR能检测到0.2 pg/μL的病毒,而本研究建立的LAMP-LFD能检测到0.2 fg/μL的病毒;引物、杂交探针只与PCV3发生反应,与其他病毒模板不发生反应;相较于常规PCR方法,LAMP-LFD方法时间更短(约1 h),且对仪器要求更低;在临床样品的检测中,常规PCR能检出的阳性样品,同时采用LAMP-LFD方法均能检出,且LAMP-LFD方法的敏感性更高于常规PCR。以上结果表明,本研究建立的PCV3 LAMP-LFD检测方法具有极高的灵敏性和特异性,操作简单反应快捷,且检测结果的可视化效果优于PCR和单一LAMP试验,在实际生产应用中具有更大的应用前景。