猪流行性腹泻病毒HBsh-1的分离鉴定和遗传演化分析

摘要

为了解河北地区猪流行性腹泻流行现状,将河北某规模化养猪场获得的腹泻病料处理后接种Vero CCL81细胞,盲传7代,各代次感染细胞裂解液中均可扩增阳性条带。经过噬斑纯化后,获得1株Vero CCL81细胞适应性良好的猪流行性腹泻病毒(PEDV)毒株,命名为HBsh-1。间接免疫荧光结果显示HBsh-1感染细胞后,能被PEDV N蛋白单克隆抗体特异性识别。分片段扩增HBsh-1的S基因后测定其序列。S基因序列分析结果表明,HBsh-1与经典毒株CV777的S基因核苷酸相似性为94.1%,氨基酸相似性为93.3%。与经典毒株相比,S基因存在4处连续核苷酸插入或缺失。S基因遗传演化分析结果显示,HBsh-1与PEDV变异毒株亲缘关系较近,属于GII-b亚型。以上研究结果表明,我们成功分离得到1株归属于GII-b亚型的PEDV新毒株,为研究分析当地PEDV流行现状和演化趋势提供依据,为制定猪流行性腹泻疫情防控策略提供参考。