辽宁省猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及其遗传变异分析

摘要

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的以仔猪腹泻、呕吐、脱水和高致死率为临床特征的一类急性、接触性肠道传染病.近年来在全国呈大规模流行,采用传统疫苗免疫,已经不能完全预防本病的发生,为查明辽宁地区PEDV流行毒株的来源及变异情况,对辽宁某地区采集的腹泻仔猪病料进行病毒分离鉴定和遗传变异分析,研究结果为建立有针对性的防控措施提供依据;进一步研究该病毒的致病性、免疫原性特征以及开发相应疫苗奠定基础.通过细胞传代分离毒株，经电镜观察、RT-PCR、中和试验、TCID50和理化性质测定等方法对病毒进行鉴定，针对PEDV高度变异区的S基因进行了克隆、测序和同源性分析，结果发现经Vero细胞盲传至第五代时，开始出现细胞病变，继续传代至18代，细胞病变仍然稳定.利用DNAStar分析发现，PEDVLN-J毒株的S基因和其他许多地方毒株均有较高的同源性，构建系统进化树发现该毒株与HB-2011-1、BJ-2001-2、CHGD-01亲缘关系较近，说明辽宁地区流行的PEDV属于输入性传播。基因序列和氨基酸比对未见较大变异。因此，在防制过程中，应重点考虑加强输入猪只的检疫及选择相应疫苗进行免疫预防。但需要强调的是近年来辽宁PED的发病率较高，仔猪死亡率也很高，需要不断分离鉴定及分析更多的流行毒株，以确证本地区PEDV流行毒株的遗传来源和变异情况。