乳脂肪球表皮生长因子Ⅷ介导的胞葬与小鼠脓毒症相关性脑病的关系

摘要

目的评价乳脂肪球表皮生长因子Ⅷ（MFG-E8）介导的胞葬与小鼠脓毒症相关性脑病的关系。方法清洁级健康雄性C57BL/6小鼠40只, 2～3月龄, 体重18～22 g, 采用随机数字表法分为4组（n=10）:假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孔（CLP）组、假手术+PBS组（Sham+PBS组）和CLP+鼠重组MFG-E8组（CLP+rmMFG-E8组）。采用CLP法制备小鼠脓毒症相关性脑病模型。Sham+PBS组、CLP+rmMFG-E8组术后连续5 d于侧脑室分别注射PBS 1 μl、rmMFG-E8 1 μg。术后第6天行新物体识别实验, 第7、8天行条件恐惧实验, 计算小鼠新物体探索时间百分比、辨别指数及条件恐惧僵直反应时间。行为学测试结束后处死小鼠, 提取海马组织, 采用Western blot法检测MFG-E8、Ras相关C3肉毒素底物1的GTP结合蛋白（GTP-Rac1）表达水平, RT-PCR法检测IL-6、TNF-α及IL-1β的mRNA表达水平, TUNEL荧光法确定细胞凋亡率。结果与Sham组比较, CLP组新物体探索时间百分比、辨别指数和僵直反应时间百分比降低, 海马MFG-E8表达下调, GTP-Rac1表达上调, IL-6、TNF-α及IL-1β的mRNA表达上调, 细胞凋亡率升高（P＆0.05）;与CLP组比较, CLP+rmMFG-E8组新物体探索时间百分比、辨别指数和僵直反应时间百分比升高, 海马MFG-E8、GTP-Rac1表达上调, IL-6、TNF-α及IL-1β的mRNA表达下调, 细胞凋亡率降低（P＆0.05）。结论海马MFG-E8介导的胞葬作用减弱可能参与小鼠脓毒症相关性脑病的病理生理机制。