术前睡眠剥夺对术后免疫抑制小鼠肠道菌群的影响

摘要

目的评价术前睡眠剥夺对术后免疫抑制小鼠肠道菌群的影响。方法 SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠72只,体重23～25 g,8～10周龄,采用随机数字表法分为5组:手术组（O组,n=18）、术前睡眠剥夺组（SR组,n=18）、伪无菌小鼠生理盐水组（GF+V组,n=12）、伪无菌小鼠给予O组小鼠粪菌滤液移植组（GF+O组,n=12）和伪无菌小鼠给予SR组小鼠术前粪菌滤液移植组（GF+SR组,n=12）。O组和SR组腹腔探查和肝叶部分切除术前7 d开始每天20 h的睡眠剥夺,连续7 d。术前2周开始连续14 d在小鼠饮水中添加光谱抗生素制备伪无菌小鼠模型,伪无菌小鼠灌胃给予生理盐水或O组、SR组术后24 h小鼠的粪便滤液（200 μl）,间隔24 h,连续14 d。术后24 h时收集小鼠粪便行16S rRNA基因高通量测序。术后或粪菌移植后24 h时测量脾脏长径并称重,流式细胞术检测血CD4+T细胞、CD8+ T细胞和调节性T细胞（Treg细胞）。结果与O组比较,SR组肠道菌群Simpson多样性指数降低,血CD4+T细胞和CD8+T细胞数减少,Treg细胞百分比增加,脾脏长径和重量减少,GF+V组血CD4+T细胞和CD8+T细胞数减少,Treg细胞百分比增加,脾脏长径和重量减少（P＆0.05）;与GF+V组比较,GF+O组血CD4+T细胞和CD8+T细胞数增加,Treg细胞百分比减少,脾脏长径和重量升高（P＆0.05）;与GF+O组比较,GF+SR组血CD4+T细胞和CD8+T细胞数减少,Treg细胞百分比增加,脾脏长径和重量减少（P＆0.05）。结论术前睡眠剥夺加重小鼠术后免疫抑制的机制与肠道菌群紊乱有关。