Nrf2-ARE通路在缺血后处理和吡那地尔后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用

摘要

目的探讨核转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）-抗氧化反应元件（ARE）通路在缺血后处理和吡那地尔后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用。方法健康雄性SD大鼠,体重200～250 g,4～5月龄,采用Langendorff灌注装置建立离体心脏灌注模型,取模型制备成功的心脏56个,采用随机数字表法,将其随机分为7组（n=8）:正常对照组（C组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血后处理组（IP组）和不同浓度的吡那地尔后处理组（PP1组、PP2组、PP3组、PP4组）。平衡灌注20min后,C组继续灌注100 min;I/R组停止灌注40 min,复灌60 min;IP组停止灌注40 min,于再灌注开始给予6次间隔灌注10 s停止灌注10 s,复灌58 min;PP1组、PP2组、PP3组、PP4组停止灌注40 min,于再灌注开始时灌注含5、10、30、50μmol/L吡那地尔的K-H液5 min,继续灌注55 min。于平衡灌注末及复灌结束时测定左室发展压（LVDP）和左室舒张期末压（LVEDP）;于复灌结束时取左心室心肌,分别采用RT-PCR法和Western blot法检测心肌Nrf2、醌氧化还原酶1（NQO1）、超氧化物歧化酶1（SOD1）及血红素加氧酶1（HO-1）的mRNA及蛋白表达水平。结果与C组比较,其余各组Nff2、NQO1、SOD1及HO-1的mRNA和蛋白表达均上调,I/R组、PP1组和PP2组复灌结束时LVDP降低,LVEDP叶高（P＜0.05）。与I/R组比较,IP组、PP3组和PP4组Nrf2、NQO1、SOD1及HO-1的mRNA和蛋白表达均上调,IP组、PP1组、PP2组、PP3组和PP4组复灌结束时LVDP升高,LVEDP降低（P＜0.05）。结论缺血后处理和吡那地尔后处理可通过激活Nrf2-ARE通路减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。