活化蛋白-1在电针上调内毒素休克兔肺组织HO-1表达中的作用

摘要

目的评价活化蛋白-1（AP-1）在电针上调内毒素休克兔肺组织血红素加氧酶-1（HO-1）表达中的作用。方法健康雄性新西兰大白兔70只,体重1.5~2.0 kg,2月龄,采用随机数字表法,将其分为7组（n=10）:正常对照组（C组）、内毒素休克诱发急性肺损伤组（ALI组）、电针+ALI组（EL组）、非穴位+电针+ALI组（NEL组）、电针+ALI+姜黄素组（ELC组）、AP-1抑制剂姜黄素组（Cur组）和二甲基亚砜组（D组）。EL组和ELC组电针刺激双侧足三里及肺俞穴,疏密波,频率15 Hz,刺激强度以兔出现轻微肌颤为宜,15 min/次,1次/d,连续5 d,留针1 h后出针;NEL组以相同电针参数刺激足三里及肺俞穴旁开0.5 cm处。电针刺激5 d后,Cur组及ELC组经耳缘静脉注射姜黄素25 mg/kg（溶于0.5 ml 0.1%二甲基亚砜）,D组静脉注射0.1%二甲基亚砜0.5 ml,其余组给予等容量的生理盐水。给药后30 min ALI组、EL组、NEL组及ELC组经耳缘静脉缓慢注射LPS5 mg/kg（溶于2ml生理盐水）,其余3组给予等容量的生理盐水。给予LPS或生理盐水后6 h时处死取肺组织行病理学评分,计算肺湿/干重比值（W/D比值）,检测肺组织MDA含量及SOD活性,采用Western blot法测定HO-1及c-Jun表达水平,采用荧光定量PCR法测定HO-1 mRNA及c-Jun mRNA表达水平。结果与C组比较,ALI组、EL组、NEL组及ELC组肺组织病理学评分、W/D比值和MDA含量升高,SOD活性降低,ALI组、EL组及NEL组HO-1 mRNA、HO-1、c-Jun mRNA和c-Jun表达上调（P＜0.05）,ELC组c-Jun mRNA和c-Jun表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）,Cur组及D组上述各指标差异无统计学意义（P＞0.05）。与ALI组比较,EL组及ELC组肺组织病理学评分、W/D比值和MDA含量降低,SOD活性升高,HO-1 mRNA和HO-1表达上调,EL组c-Jun mRNA和c-Jun表达上调,ELC组c-Jun mRNA和c-Jun表达下调（P＜0.05）,NEL组上述各指标差异无统计学意义（P＞0.05）;与EL组比较,ELC组肺组织病理学评分、W/D比值、MDA含量升高,SOD活性降低,HO-1 mRNA、HO-1、c-Jun mRNA及c-Jun表达下调（P＜0.05）。结论内毒素休克诱发兔急性肺损伤时,电针可通过活化AP-1而上调HO-1表达起到肺保护作用。