Nrf2/HO-1信号通路在远端缺血预处理减轻小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用

摘要

目的评价核转录因子NF-E2相关因子2/血红素加氧酶-1（Nrf2/HO-1）信号通路在远端缺血预处理减轻小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用。方法健康雄性C57BL/6小鼠68只,6～8周龄,体重22～26 g,采取随机数字表法分为4组（n=17）:对照组（C组）、急性肺损伤组（ALI组）、远端缺血预处理组（RIPC组）、鸦胆子苦醇+远端缺血预处理组（B+RIPC组）。C组气管内注入生理盐水100μl;ALI组气管内注入LPS 5 mg/kg制备急性肺损伤模型;RIPC组于制备急性肺损伤模型前I h,施行远端缺血预处理:将止血带置于小鼠右后肢,充气5 min后放气5 min,共6个循环;B组于制备急性肺损伤模型前10 d开始,隔天腹腔注射Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇2 mg/kg（溶于1%二甲基亚砜100μl中）;B+RIPC组于制备急性肺损伤模型前10 d,隔天腹腔注射鸦胆子苦醇2 mg/kg,模型制备前1 h时行远端缺血预处理。模型制备后24 h时,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,测定蛋白浓度,并行中性粒细胞计数;然后处死小鼠,取肺组织,计算含水率,光镜下观察病理学结果,采用比色法测定MPO活性,采用ELISA法检测IL-1β和TNF-α的含量,采用Western blot法测定Nrf2、HO-1和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）的表达水平。结果与C组比较,ALI组肺组织含水率、MPO活性、IL-1β和TNF-α含量、BALF中性粒细胞计数和蛋白浓度升高,肺组织Nrf2、HO-1和HMGB1表达上调（P＜0.05）;与ALI组比较,RIPC组肺组织含水率、MPO活性、IL-1β和TNF-α含量、BALF中性粒细胞计数和蛋白浓度降低,肺组织Nrf2和HO-1表达上调,HMGB1表达下调（P＜0.05）,病理学损伤减轻;与RIPC组比较,B+RIPC组组肺组织含水率、MPO活性、IL-1β和TNF-α含量、BALF中性粒细胞计数和蛋白浓度升高,肺组织Nrf2和HO-1表达下调,HMGB1表达上调（P＜0.05）,病理学损伤加重。结论Nrf2/HO-1信号通路的激活参与了远端缺血预处理减轻大鼠内毒素性急性肺损伤。