Ropporin基因在人精子中的表达和意义

摘要

目的 检测ropporin基因在人精子中的表达.探讨Ropporin抗体对人精子运动的影响,评价Ropporin蛋白在精子运动中的功能.方法 收集正常男性精子,非连续梯度离心法分离精子,用RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光方法检测ropporin基因在精子中的表达和蛋白定位;将纯化精子分别在含不同浓度Ropponn抗体的培养液中孵育(0,0.8,4和20 μ g/mL),在不同时间点(1,2,6h)用精子计算机辅助分析系统(computer-assisted sperm analysis,CASA)检测精子活动力.结果 RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光方法均检测出ropporin基因在精子中表达;免疫荧光表明Ropporin主要定位在精子鞭毛的主段和末段;抗体实验显示抗体孵育1h、2h、6h后精子的快速前向运动(a级)和慢速前向运动(b级)均明显受到抑制,并显示剂量依赖性.结论 Ropporin在精子鞭毛的主段和末段上的表达与精子的运动密切相关.