一种研究生物大分子与其小分子配基相互作用的毛细管电泳新方法

摘要

建立了一种定量研究大分子与小分子间相互作用的毛细管电泳新方法,即在线微透析三电极系统亲和毛细管电泳法.本法可测定小分子 的自由浓度而不受蛋白质大分子的干扰.详细介绍了实验装置的制作,探讨了进样机制 .作为实例,研究了生理条件下pH 7.4, 50 mmol/L磷酸介质中, 牛血清白蛋白与磺胺甲基异□唑、L-色氨酸、D-色氨酸的亲和常数的测定, 其值分别为5.8×104 L/m ol, 2.3 ×104 L/mol,1.77×103 L/mol.本法较简便,能在生理环境下测定,样品用量亦少.