脱氧核糖核酸-聚胺基酰胺树状间隔臂-(二氧化锆-脲醛树脂)亲和色谱固定相的合成及其应用

摘要

报道了一种高效液相亲和色谱固定相的合成方法.以3～5 μm的非多孔二氧化锆与脲醛树脂(UFR)复合物微球用作高效液相亲和色谱固定相的基体,并用扫描电子显微镜检验该基体的结构和粒径.用此基体末端的酰胺基团为核心,分别与丙烯酸甲酯、乙二胺重复进行三次马氏加成反应和胺化反应,就形成末端为胺基的聚胺基酰胺(PAMAM)星型树状间隔臂.用13C固体核磁共振检测了树状间隔臂的拓扑结构.此间隔臂用丁二酸进行丁二酰化,并在1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳化二胺(EDAC)的存在下用N-羟基丁二酰亚胺(NHS)活化,最后与配位体脱氧核糖核酸(DNA)键合,并用紫外分光光度法测定了配位体容量.从而制备了一种[DNA-(PAMAM)-( ZrO2-UFR)]高效液相亲和色谱固定相.通过优化色谱柱操作参数,其已用于蛋白质的分析和核糖核酸(RNA)碎片的分离.