蛋白质组学技术筛选与鉴定鲤鱼嗅脑急性创伤后的应激蛋白质

摘要

优化建立鲤鱼(cyprinus carpio,CC)嗅觉端脑(嗅脑)全蛋白提取技术.联用低渗透裂解和液氮冻溶法破碎鲤鱼嗅脑组织(rhinencephalon tissue of cyprinus carpio, CCRT)、低速离心提取CCRT全蛋白,并采用双向凝胶电泳(2D-PAGE)技术进行有效分离.经分析与统计,每张CCRT的2D-PAGE图谱中的蛋白质斑点数目约为1200个.分别分离CCRT的脂溶性和水溶性全蛋白,并获得高分辨率的2D-PAGE图谱.选用差异蛋白质组学技术筛选经10%冰醋酸创伤后的CC,其端脑组织所表达出的6种应激蛋白质,并用肽质量指纹谱(peptide mass fingerprinting, PMF)和数据库检索技术给予鉴定.其中3种蛋白质为70S热休克蛋白、β微管蛋白和DNA链接酶IV,有望作为研究大脑急性创伤后的应激修复途径和机理的指示蛋白质.