酶解-UPLC-MS/MS法同时测定咸鸭蛋黄中的11种胆固醇氧化物

摘要

建立了酶解-超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时检测咸鸭蛋黄中11种胆固醇氧化物(COPs)的方法.咸鸭蛋黄样品经过脂肪酶37℃酶解,正己烷-乙醚混合液(8∶2,V/V)提取,Silica固相萃取柱净化.采用Waters HSS T3柱(100 mm×2.1 mm,0.3 μm),以0.1％甲酸的水相和甲醇/乙腈(1∶1,V/V)混合液的有机相梯度洗脱,实现了11种COPs的基线分离.以d7-7α-OH-胆固醇为内标,在APCI-MS/MSMRM模式下定量检测.结果表明,11种COPs在对应的20～1200 ng/mL和200～ 3500 ng/mL线性范围内,相关系数均大于0.996,3个加标水平的回收率在79.3％～104.1％之间,日间RSD在2.0％～12.9％之间;定量限范围在0.08～0.40μg,/g之间.本方法具有较好的重复性和准确性,并成功应用于咸鸭蛋黄中的11种COPs含量的分布检测.