新型氯霉素化学发光芯片免疫检测方法的建立及应用

摘要

采用氯霉素(CAP)全抗原CAP-HS-BSA免疫新西兰兔,获得抗CAP多克隆抗体,测得效价为2×105,此抗体与CAP结构类似物的交叉反应率均小于0.01％,特异性良好.在此基础上,分别建立了特异性检测氯霉素残留的间接竞争酶联免疫吸附法(ic-ELISA)和基于iPDMS膜的化学发光芯片免疫检测法,并用于实际牛奶样品中CAP的检测.建立的ic-ELISA法的半数抑制浓度(IC50)为12.9 ng/mL,线性检测范围(IC20～IC80)为0.8～250.0 ng/mL,检出限(IC10)为0.1 ng/mL,回归方程B/B0=-0.2028lgCCAP+0.7281(R2=0.9926).牛奶样品中加标回收率为81.8％ ～97.9％,相对标准偏差(RSD)小于10％.建立的化学发光芯片免疫检测方法的半数抑制浓度为263.0 ng/mL,线性范围(IC20～IC80)为1～5000 ng/mL之间,检出限(IC10)为1 ng/mL,回归方程B/B0=-0.1781 lgCCAP+0.9318(R2=0.9891),牛奶中CAP的加标回收率为77.0％ ～100.5％,RSD<15％.