反义及正义α-SMA的表达对成纤维细胞与平滑肌细胞的影响

摘要

目的:利用α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)基因,重组反义和正义逆转录病毒载体,评价α-SMA逆转录病毒对NIH3T3细胞和血管平滑肌的影响.方法:用含全长α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)cDNA的质粒DNA的酶切、连接,重组反义和正义α-SMA的目的cDNA,构建逆转录病毒载体,并感染培养的NIH3T3细胞与平滑肌细胞,进行细胞形态学和基因表达的观察.结果:反义和正义重组逆转录病毒能够携带的目的基因并成功整合到NIH3T3细胞基因组中;利用两种逆转录病毒分别感染NIH3T3、血管平滑肌细胞,发现对细胞生长和形态有一定的影响,反义重组逆转录病毒使细胞活性下降、基因表达减弱,而正义重组逆转录病毒使细胞活性下降、基因表达增强明显.结论:α-SMA重组病毒对细胞的形态、突起的生长甚至细胞的生存均有影响.