VEGF基因体外转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究

摘要

目的:探讨脂质体介导血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCS)应用于基因治疗的可行性、安全性.方法:体外分离、培养、鉴定MSCs,PcDNA3.1(-)/VEGF16 5质粒转染MSCs,转染后用免疫荧光和ELISA检测MSCs表达VEGF蛋白的情况,MTT检测MSCs对VEGF质粒转染的敏感性.结果:骨髓中分离得到MSCs,流式细胞检测显示MSCs不表达CD34和CD4 5,但表达CD90.透射电镜观察可见细胞浆中含大量粗面内质网和分泌颗粒.VEGF基因转染MSCs后第5天抗VEGF免疫荧光染色约90%的MSCs呈阳性,ELISA检测结果显示PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染组细胞培养上清液中VEGF含量明显高于对照组,并于转染后第5天达到峰值.MTT检测结果显示VEGF质粒转染对MSCs增殖无影响.结论:MSC可作为VEGF基因转染的靶细胞用于基因治疗.