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一种体内高效表达反义RNA、三链形成RNA及Ribozyme的新载体

     

摘要

为了在体内高效表达反义RNA、三链形成RNA及Ribozyme,通过PCR克隆技术构建了一种全新载体pBSKneorU6'.该载体利用hsnRNA U6基因表达单元的特性,保留了U6RNA 分子5' 端维持分子稳定性的发夹和帽式结构的序列,缺失了其中间参与mRNA前体剪切的部分,取而代之的是3个限制性内切酶位点.Hela细胞核抽提物体外转录实验证明该载体可有效地表达U 6变体RNA分子.该载体携带新霉素抗性基因neor,因而可用于真核细胞稳定转染的筛选.

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