丙泊酚对内毒素诱导内皮细胞通透性和细胞骨架的影响

摘要

目的 研究丙泊酚对内毒素诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)单层通透性和细胞骨架变化的影响.方法 HUVECs细胞株培养鉴定后随机分7组,每组5份,施以相应处理:①对照组(C组);②内毒素组:脂多糖(LPS)终浓度分别为1 mg/L和10 mg/L(LPS1组及LPS10组);③丙泊酚组(P4组):丙泊酚终浓度为4 mg/L;④脂质溶剂组(I4组):脂质溶剂体积和浓度同P4组;⑤丙泊酚+内毒素组(P4+LPS10组):丙泊酚和LPS的终浓度分别为4 mg/L和10 mg/L;⑥脂质溶剂+内毒素组(I4+LPS10组):脂质溶剂和LPS的终浓度分别为4 mg/L和10 mg/L.孵育6 h后测定内皮细胞单层滤过系数(Kf)和蛋白质渗透压反射系数(σ)以反映内皮细胞单层通透性的变化;荧光染色法测定内皮细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)及细胞化学技术检测硝基酪氨酸(NT)的表达.结果 与C组比较,LPS作用使内皮细胞Kf增加,蛋白质σ减少(P均＜0.01),F-actin含量降低,NT蛋白表达显著增加(P＜0.01),尤以高浓度LPS作用更明显.P4+LPS10组可显著减少LPS 引起的内皮细胞Kf和蛋白质σ的变化,抑制10 mg/L LPS引起的F-actin解聚和NT蛋白增加(P均＜0.01).而I4+LPS10组无上述保护效应.结论 丙泊酚可减少LPS所致单层内皮细胞通透性的增加,这种保护作用可能是通过抑制LPS引起的过氧亚硝基阴离子(ONOO-)过量生成,从而稳定内皮细胞骨架来实现的.