脓毒症新生大鼠胼胝体内轴突发育障碍对 后期神经功能的影响

摘要

目的：观察脓毒症新生大鼠胼胝体内轴突发育情况，探讨其对后期神经功能的影响。方法按随机数字表法将出生1d的SD大鼠分为对照组和脓毒症组，每组24只。采用腹腔注射脂多糖（LPS）1mg/kg的方法制备脓毒症模型，对照组给予等量磷酸盐缓冲液（PBS）。两组分别于制模后7、14、28d处死幼鼠取大脑胼胝体，应用免疫荧光及蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测胼胝体内神经纤维丝蛋白重、中、轻链（NFH、NFM、NFL）的表达；28d时于电镜下观察胼胝体内轴突形态及数量，原位杂交实验观察胼胝体内髓鞘碱性蛋白（MBP）的阳性细胞数。结果脓毒症组制模后7、14、28d胼胝体内NFH、NFM、NFL免疫荧光表达强度较对照组明显减弱，WesternBlot结果也显示，NFH、NFM、NFL蛋白表达均较对照组明显降低〔NFH（灰度值）：7d为0.16±0.03比0.34±0.04，14d为1.75±0.11比2.42±0.17，28d为3.39±0.25比5.11±0.23；NFM（灰度值）：7d为0.34±0.04比0.53±0.04，14d为0.74±0.04比1.12±0.07，28d为0.92±0.06比1.52±0.07；NFL（灰度值）：7d为0.12±0.02比0.26±0.14，14d为0.32±0.03比0.81±0.04，28d为0.85±0.08比1.81±0.05；P＜0.05或P＜0.01〕。28d时，对照组胼胝体内轴突发生了明显的髓鞘化，郎飞节清晰可见、结构完整、边缘光滑；脓毒症组胼胝体内髓鞘化轴突数明显减少，轴突郎飞节明显受损，MBP阳性细胞数较对照组明显减少（个/LP：23.67±3.21比35.00±3.61，P＜0.01）。结论脓毒症新生幼鼠生后28d胼胝体内轴突发育受损，导致轴突低髓鞘化，可影响后期的神经功能。