农杆菌介导的棉花子叶瞬时表达系统的建立

摘要

植物瞬时表达系统在研究功能基因的亚细胞定位、蛋白质互作、启动子活性等方面具有重要作用.选取棉花(Gossypium hirsutum)子叶为材料,以β-葡糖醛酸酶基因(GUS)、增强型绿色荧光蛋白基因(eGFP)为报告基因,对棉花子叶生长时间、农杆菌浓度、注射量、共培养时间等因素进行了分析,建立了农杆菌介导的棉花子叶瞬时表达系统.结果表明,对萌发6天的棉花子叶注射50 μLOD600为0.5的含目的基因的农杆菌LBA4404或GV3101,共培养2-3天后,外源基因表达效率最高.利用此方法从棉花萌发到观测结果,仅需8-13天,且操作简单易行,可快速检测棉花来源的启动子活性、亚细胞定位、蛋白质互作等.该方法在棉花基因功能研究方面有很好的应用价值.