铜绿假单胞菌噬菌体裂解酶的克隆表达及活性

摘要

为了研究使用酵母表达系统表达重组铜绿假单胞菌噬菌体裂解酶的效果,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)将铜绿假单胞菌噬菌体裂解酶基因ly23克隆至酵母表达载体pSEP1和pSEP1alpha上,并分别转化至酿酒酵母细胞,对胞内表达及分泌表达重组噬菌体裂解酶LY23的表达水平及裂解活性进行测定。结果表明,用酿酒酵母表达系统分泌表达的LY23粗酶液处理10min后,铜绿假单胞菌菌液的OD620值下降约50%,且比浊法测定显示LY23对铜绿假单胞菌具有较为显著且专一的裂解活性。本文研究使用酵母表达系统可分泌表达具备裂解活性的噬菌体裂解酶,可为后期探讨其分离纯化提供基础。