HGF+EGF联合诱导大鼠BMSCs分化肝样细胞的研究

摘要

目的 在成功分离并培养大鼠骨髓间充质干细胞的基础上,用HGF、EGF以及HGF+EGF诱导其向肝细胞方向分化,并采用不同方法鉴定细胞分化能力,试图为肝细胞移植等寻找新的种子细胞来源.方法 应用HGF、EGF、HGF+EGF诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞.实验分组:A组:未加任何诱导因素的BMSCs;B组:HGF(20 ng/ml),诱导分化BMSCs;C组:EGF(10 ng/ml),诱导分化BMSCs;D组:HGF(20 ng/ml)+EGF(10 ng/ml),诱导分化BMSCs.相差显微镜下观察细胞形态的变化;在诱导第7、21天行免疫细胞化学染色检测肝细胞标志AFP和CK18.结果 在加入各种诱导成分后,梭形或成纤维细胞样细胞随着诱导时间的延长,变成纺锤形、不规则圆形或多角形细胞,数量逐渐变多,形似肝细胞.在诱导分化第7天和21天免疫细胞化学染色各诱导组均可检测出AFP和CK18表达,图像分析表明HGF+EGF联合诱导分化的AFP、CK18阳性率最高,HGF次之,EGF则较弱.结论 HGF、EGF、HGF+EGF均能诱导大鼠骨髓间充质千细胞分化为肝样细胞,分化后的肝样细胞能分泌肝细胞特异性产物AFP、CK18.