左旋紫草素对顺铂耐药人宫颈癌HeLa细胞的逆转作用研究

摘要

目的:探讨左旋紫草素(L-SHK)对顺铂(DDP)耐药人宫颈癌HeLa细胞(HeLa/DDP)的逆转作用及其可能机制.方法:以人宫颈癌HeLa细胞株为研究对象,以DDP诱导获得HeLa/DDP耐药细胞;采用CCK-8法测定HeLa/DDP细胞的耐药指数以及不同剂量L-SHK(0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16μmol/L)对该细胞的抑制率、半数抑制浓度(IC50)和逆转倍数;采用流式细胞术检测低、中、高剂量L-SHK(0.3、0.6、1.2μmol/L)联合DDP对HeLa/DDP细胞周期及凋亡率的影响,采用Western blotting法检测低、中、高剂量L-SHK(0.3、0.6、1.2μmol/L)联合DDP对HeLa/DDP细胞凋亡相关蛋白[剪切型胱天蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、Bcl-2、Bax]表达的影响.结果:所得HeLa/DDP细胞的耐药指数为11.8.L-SHK对HeLa/DDP细胞的抑制率有随剂量增加而逐渐升高的趋势.与单用DDP比较,DDP+低、中、高剂量L-SHK组细胞的IC50值均显著降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);DDP+低、中、高剂量L-SHK组的逆转倍数分别为1.38、2.80、6.71.与空白对照组比较,各药物组G0/G1期、S期细胞比例,各剂量L-SHK联用组细胞的早期、晚期凋亡率及总凋亡率以及Bax、Cleaved caspase-3蛋白的表达量均显著升高;各药物组G2/M期细胞比例以及各剂量L-SHK联用组Bcl-2蛋白的表达量均显著降低(P<0.05).与DDP组比较,各剂量L-SHK联用组S期、G2/M期细胞比例和Bcl-2蛋白的表达量均显著降低;G0/G1期细胞比例,早期、晚期凋亡率及总凋亡率和Bax、Cleaved caspase-3蛋白的表达量均显著升高(P<0.05).结论:HeLa/DDP细胞对DDP具有一定的耐药性,L-SHK可逆转这种耐药性.L-SHK和DDP联用可促进HeLa/DDP细胞凋亡,且作用强于DDP单用;这种作用可能与影响细胞周期、调控凋亡相关蛋白的表达有关.