HPLC-ECD法测定大鼠脑组织中单胺类神经递质的含量

摘要

目的:建立测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质含量的方法.方法:采用高效液相色谱-电化学法,以2,5--二羟基苯甲酸为内标,测定大鼠大脑皮层、小脑、海马组织、下丘脑、嗅球中以去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)为代表的单胺类神经递质的含量.色谱柱为DIKMA C18,流动相为缓冲盐溶液(醋酸钠、庚烷磺酸钠、乙二胺四乙酸二钠和柠檬酸)-甲醇(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,工作电压为+0.7 V.结果:NE、5-HT的检测质量浓度线性范围分别为0.084～4.2 μg/ml(r=0.999 9)和0.005～0.25 μg/ml(r=0.999 1),平均加样回收率分别为98.85％ (RSD=2.89％,n=3)和101.5％(RSD=2.41％,n=3),日内(n=5)和日间(n=3)RSD均不大于3％;NE在小脑中的含量最低[(0.343±0.14) mg/g],在下丘脑中含量最高[(3.062±1.51)mg/g]; 5-HT在小脑中的含量最低[(0.059±0.04) mg/g],在大脑皮层中含量最高[(0.383±0.21) mg/g].结论:本方法灵敏、简便、快速,可用于大鼠脑组织中NE、5-HT含量的测定.