马来酸噻吗洛尔滴眼液中有关物质的测定及杂质定性研究

摘要

目的:建立测定马来酸噻吗洛尔滴眼液中有关物质的方法,并对其杂质进行定性.方法:采用高效液相色谱法测定有关物质的含量,色谱柱为ACES C18,流动相为甲醇与4.32 g/L辛烷磺酸钠溶液(冰醋酸调pH至3.0)的混合溶液(50:50,V/V)-甲醇(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为295 nm,柱温为30℃,进样量为20μL.采用制备液相色谱法制备杂质纯品,色谱柱为YMC-PACK ODS-A,流动相为甲醇-0.01％三氟乙酸(40:60,V/V)和甲醇-0.01％三氟乙酸(20:80,V/V),流速为8 mL/min,检测波长为295 nm,柱温为20℃,进样量为0.8 mL.采用液相色谱串联质谱法进行结构推测,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18,流动相为甲醇-5 mmol/L甲酸铵溶液(含0.05％甲酸)(梯度洗脱),流速为0.2 mL/min,柱温为20℃,进样量为2μL;采用电喷雾离子源,以质谱全扫描模式检测母离子,以子离子扫描模式检测碎片离子.采用氢谱、碳谱进行结构确证和推测.结果:马来酸噻吗洛尔检测质量浓度线性范围为0.501～10.02μg/mL(r=0.9999);定量限为3.012 ng,检出限为1.004 ng;精密度试验的RSD为0.2％,稳定性和重复性试验的RSD均小于5％.确证了杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的结构,并推测了杂质Ⅳ和Ⅴ的结构.结论:该方法快速、准确、专属性好,可用于马来酸噻吗洛尔滴眼液的质量控制.