人血浆中羟氯喹高效液相色谱测定方法的建立及其应用

摘要

目的:建立一种实用的HPLC法测定人血浆中羟氯喹的血药浓度,并将其应用于患者的治疗药物监测.方法:取人血浆样品300 μl加入乙腈沉淀,取上清液加入的二氯甲烷萃取,取二氯甲烷层挥干后加入流动相复溶,进行色谱分析.采用DIKMA C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离,以0.02 mol·L-磷酸二氢钾-乙腈(88∶12,v/v,pH=3.00)为流动相,检测波长:215 nm,流速:1.0 ml·min-1,进样体积:20μl,甲硝唑作为内标物质.采用建立的方法分析患者用药后血浆标本.结果:羟氯喹在0.1～3.0 μg·ml-1线性关系良好(r=0.998 7),低、中、高质控样本(0.25,1,2μg·ml-1)的批内、批间精密度RSD均小于12％,准确度介于91％～102％,提取回收率为(68.56±2.33)％,内标物质的提取回收率为64.99％,短期稳定性、长期稳定性、冻融稳定性均RSD小于6.27％.14名患者的平均血浆谷浓度为(0.99±0.38) μg·ml-1.结论:本方法操作简便、灵敏度及准确度均较高,适用于人体羟氯喹血药浓度的检测.