五灵胶囊有效成分对TGF-β1诱导HSC-T6表达Ras/ERK、TGF-β/Smad信号通路蛋白的影响

摘要

目的:研究五灵胶囊有效成分对转化生长因子(TGF-β1)诱导HSC-T6细胞表达Ras/ERK、TGF-B/Smad信号通路蛋白的作用,探寻产生药效的主要化学成分.方法:HSC-T6细胞分组:对照组、TGF一131(10 ng·ml-1)组、PD98059组、PT组、五味子醇甲、五味子乙素、柴胡皂苷、柴胡多糖、丹参新醌乙、X1、二氢丹参酮Ⅰ(各100 μg·ml1)、丹参酚酸B(10 ng·ml-1)组,培养24 h(10 ng·ml-1TGF-β1于最后12 h加入);ELISA检测培养上清中COL-Ⅰ,Western Blot检测COL-Ⅰ、а-SMA、Ras、ERK、P-ERK、TβR I、TβRⅡ、Smad2/3蛋白表达.结果:与TGF-β1组相比,各有效成分组能明显降低COL-1分泌,其中以X1、丹参新醌乙、二氢丹参酮Ⅰ、五味子醇甲、丹参酚酸B为显著(P<0.05),同时各药物组能显著下调COL-Ⅰ、а-SMA、ERK、P-ERK、TβRⅠ、TβRⅡ蛋白表达(P<0.05);五味子醇甲、X1、二氢丹参酮I能显著下调表达Ras蛋白(P<0.叭);柴胡皂苷对TβR Ⅰ表达无作用;X1、醇甲、乙素、二氢丹参酮Ⅰ、柴胡多糖能显著下调Smad2/3蛋白表达(P<0.01).结论:五灵胶囊有效成分对Ras/ERK和TGF-β1/Smad信号通路蛋白的作用不尽相同,强度也不尽一致.抗纤维化作用的最强的成分是X1、二氢丹参酮Ⅰ、柴胡多糖、五味子醇甲,丹参新醌乙的作用较弱.